【凝胶过滤层析的原理是什么?】凝胶过滤层析（Gel Filtration Chromatography），也称为分子排阻色谱（Size-Exclusion Chromatography, SEC），是一种基于分子大小差异进行分离的技术。其核心原理是利用多孔凝胶颗粒作为固定相，不同大小的分子在通过凝胶柱时会因扩散进入孔隙的能力不同而被分开。
在实际操作中，样品中的分子根据其分子量大小被分离开来：小分子可以进入凝胶颗粒内部的孔隙，因此在柱内停留时间较长；而大分子则无法进入孔隙，只能在凝胶颗粒之间的空隙中移动，因此流出速度较快。这种差异使得不同分子按分子量顺序被洗脱出来。
凝胶过滤层析原理总结
| 项目 | 内容说明 |
| 技术名称 | 凝胶过滤层析 / 分子排阻色谱（SEC） |
| 基本原理 | 基于分子大小差异进行分离，利用多孔凝胶颗粒作为固定相 |
| 分离机制 | 小分子可进入凝胶孔隙，大分子被排斥，导致迁移速度不同 |
| 主要应用 | 蛋白质、多肽、核酸等生物大分子的纯化与分析 |
| 优点 | 操作简单、条件温和、适合热敏感物质 |
| 缺点 | 分辨率有限，对分子量相近的物质分离效果较差 |
| 常用凝胶材料 | 葡聚糖（Sephadex）、琼脂糖（Sepharose）、聚丙烯酰胺等 |
总结
凝胶过滤层析是一种依赖于分子尺寸差异的分离方法，广泛应用于生物化学和分子生物学领域。通过合理选择凝胶类型和实验参数，可以有效实现对目标分子的分离与纯化。虽然其分辨率相对较低，但在处理热敏性或大分子样品时具有显著优势。
